Rznomics presenta la propria tecnologia della piattaforma RNA circolare

SEONGNAM, Corea del Sud, 3 agosto 2023 /PRNewswire/ -- Rznomics ha sviluppato una nuova tecnologia di piattaforma denominata "struttura di RNA autocircolarizzata" in grado di generare in modo efficiente e semplice RNA circolare e superare i limiti della tecnologia esistente. Rznomics ha pubblicato un articolo riguardante la sua strategia di sviluppo e la sua efficacia sulla rivista "Molecular Therapy Nucleic Acids".

Dopo il successo del vaccino contro il COVID-19, la tecnologia dell’mRNA è stata studiata con grande interesse in vari campi, come i vaccini e le terapie. Tuttavia, l'mRNA lineare convenzionale è vulnerabile alle nucleasi e gli acidi nucleici modificati protetti da brevetto devono essere utilizzati per un'espressione proteica efficiente con la riduzione delle risposte immunitarie indesiderate.

Per superare gli inconvenienti degli RNA lineari convenzionali menzionati sopra, la tecnologia della struttura dell’RNA circolare ha recentemente attirato l’attenzione. L'RNA circolare (circRNA) ha una struttura chiusa, quindi ha una grande stabilità contro le nucleasi ed è stato riportato che non ci sono influenze sulle risposte immunitarie indesiderate e sull'espressione proteica senza l'uso di nucleotidi modificati. Pertanto, se commercializzati, i vaccini o le terapie a base di circRNA saranno potenzialmente più competitivi nel prezzo e avranno la stessa efficacia equivalente all’RNA lineare in una quantità minore.

Attraendo investimenti su larga scala, un paio di importanti aziende biotecnologiche negli Stati Uniti guidano il settore di ricerca e sviluppo del circRNA e mostrano le aspettative del mercato. Nel caso di una di queste aziende, utilizza una tecnologia di produzione di circRNA basata sul ribozima intronico del gruppo I, chiamata metodo Permuted Intron-Exon (PIE). Il metodo PIE divide il ribozima, che è stato utilizzato nella reazione di splicing cis per rimuovere l'introne e collegare gli esoni fiancheggianti, a metà e collega ciascuna metà del ribozima a entrambe le estremità del GOI (gene di interesse) per creare il circRNA con specifico GOI. Sin dalla fase di immaturità del campo del circRNA, ci sono spazi perché le aziende biotecnologiche possano partecipare alla competizione. Tuttavia, per entrare nel mercato con competitività, è essenziale una piattaforma tecnologica innovativa e di base che superi i limiti delle tecnologie esistenti.

Rznomics ha sviluppato una nuova tecnologia di produzione di RNA circolare che utilizza anche il ribozima dell'introne del gruppo I. Tuttavia, la tecnologia è fondamentalmente diversa dal metodo PIE nel meccanismo di circolarizzazione. Rznomics ha recentemente pubblicato la propria tecnologia di RNA circolare on line in Molecular Therapy Nucleic Acids (DOI: https://doi.org/10.1016/j.omtn.2023.07.034, Titolo: Efficient circolare RNA engineering by end-to-end self -targeting and splicing reactor using Tetrahymena ribozyme), la rivista ufficiale dell'American Society for Gene and Cell Therapy (ASGCT). Rznomics ha applicato la sua esclusiva tecnologia della piattaforma di ribozima trans-splicing Tetrahymena per convertire in modo efficace l'RNA lineare in RNA circolare progettando una reazione STS (self-targeting and splicing) end-to-end.

Come mostrato nella figura, un costrutto di RNA è stato progettato per collegare il GOI all'estremità del ribozima dell'introne del gruppo I. In questo costrutto, il sito target che può essere preso di mira dal ribozima e l'IGS (Internal Guide Sequence) che guida la trans-ligazione mirata mediante accoppiamento di basi con il sito target sono stati progettati per essere localizzati su entrambe le estremità per consentire la formazione di RNA circolare attraverso un reazione di autocircolazione.

Il punto più notevole è che, a differenza del metodo PIE, la tecnologia di circolarizzazione di Rznomics non lascia tracce di informazioni genetiche non necessarie nel GOI (Gene of Interest) dopo la reazione di autocircolarizzazione. Nel caso della Torta, il ribozima deve collegare entrambe le estremità del GOI che ospitano sequenze nucleotidiche specifiche estranee per formare un RNA circolare. Mentre, nel caso della reazione STS, il ribozima porta all'autocircolazione progettando che qualsiasi sequenza bersaglio presente nel GOI venga localizzata alla fine del GOI.

Inoltre, Rznomics ha confermato che l’efficienza della circolarizzazione è paragonabile all’efficienza del metodo PIE. Inoltre, a causa della natura della reazione STS, è possibile stabilire varie strategie di ottimizzazione per aumentare l'efficienza di autocircolazione, a differenza del metodo PIE. Si ritiene che l'efficienza di autocircolazione diminuisca con la lunghezza del gene di interesse. Tuttavia, nel caso della tecnologia Rznomics, è possibile vagliare una sequenza target ottimale che massimizza l’efficacia dell’autocircolazione. Rznomics ha affermato che, attraverso la reazione basata su STS, l'RNA lungo come l'RNA della distrofina umana (11.265 nucleotidi) è stato auto-circolarizzato con successo.